液氮速凍處理對樣本保存的影響

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1.液氮速凍處理對樣本保存的影響 液氮速凍處理的10頭亞洲小車蝗樣本在12h內(nèi)均無存活跡象。說明通過液氮速凍處理能夠使亞洲小車蝗活體樣本迅速死亡，從而消除因逆境脅迫造成的樣本本身生理生化變化，避免了這些變化對蝗蟲樣本基因組DNA提取產(chǎn)生可能的不利影響。

2.不同保存方法對基因組 DNA提取影響亞洲小車蝗經(jīng)基因組DNA提取后，用1%的瓊脂糖凝膠電泳檢測結(jié)果見圖1～3。由圖可見，液氮速凍后保存和無水乙醇保存的樣本提取的基因組DNA電泳條帶清晰、無拖尾且亮度高，說明得到的DNA濃度較大；直接冷凍保存的樣本提取的DNA電泳檢測結(jié)果顯示條帶整齊、無拖尾，但是亮度較低，說明得到的DNA濃度較小；蝗蟲干標(biāo)本提取的基因組DNA電泳檢測顯示條帶不清楚，并有明顯拖尾現(xiàn)象，有的甚至看不到條帶，說明干制標(biāo)本保存會導(dǎo)致蝗蟲基因組DNA發(fā)生嚴(yán)重降解，會對下一步基因擴(kuò)增、分子標(biāo)記等分子生物學(xué)試驗(yàn)的進(jìn)行造成不利的影響。

3.冷凍脅迫對基因組DNA提取影響對比液氮速凍后保存和直接冷凍保存兩種樣本保存方法對蝗蟲基因組DNA提取結(jié)果可以看出，液氮速凍后保存的樣本提取的基因組DNA明顯比直接冷凍保存的樣本基因組DNA的電泳條帶亮度高，說明液氮速凍后保存得到的DNA的濃度較大。由此得出，樣本在受到冷凍脅迫死亡的過程中會發(fā)生基因組DNA降解現(xiàn)象，使提取得到的DNA 的濃度較小。所以，液氮速凍后保存更適合昆蟲基因組學(xué)的研究。